技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES在過去十年內(nèi),科學(xué)家們已經(jīng)將來自微生物的CRISPR系統(tǒng)改造成了基因編輯技術(shù),這是一種精確的、可編程的修改DNA的系統(tǒng)。如今,在一項(xiàng)新的研究中,來自美國(guó)麻省理工學(xué)院麥戈文研究所和布羅德研究所的研究人員發(fā)現(xiàn)了一類新的可編程的DNA修改系統(tǒng),稱為OMEGA(ObligateMobileElementGuidedActivity),它們可能天然地參與了在整個(gè)細(xì)菌基因組中重排小片段DNA的工作。相關(guān)研究結(jié)果于2021年9月9日在線發(fā)表在Science期刊上,論文標(biāo)題為“Thewide...
基因載體是基因工程的核心,也是基因治療中強(qiáng)有力的生物工具,我們先來認(rèn)識(shí)和閱讀載體圖譜吧。一、載體分類及載體組成元件載體分類1、按屬性分類:病毒載體和非病毒載體病毒載體是一種常見的分子生物學(xué)工具,可將遺傳物質(zhì)帶入細(xì)胞,原理是利用病毒具有傳送其基因組進(jìn)入目的細(xì)胞,進(jìn)行感染的分子機(jī)制。可發(fā)生于完整活體或是細(xì)胞培養(yǎng)中。可應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、基因療法或疫苗。用于基因治療和疫苗的病毒載體應(yīng)具備以下基本條件:(1)攜帶外源基因并能包裝成病毒顆粒;(2)介導(dǎo)外源基因的轉(zhuǎn)移和表達(dá);(3)對(duì),人體不...
mRNA上3個(gè)相鄰的堿基決定1個(gè)氨基酸。每3個(gè)這樣的堿基叫做1個(gè)密碼子。密碼子優(yōu)化是通過基因工程技術(shù),根據(jù)宿主的密碼子偏好性調(diào)整基因的同義密碼子,達(dá)到消除稀有密碼子的目的,并且優(yōu)化如mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)和Motif等相關(guān)參數(shù),從而提高翻譯效率。當(dāng)異源基因在宿主中無法有效表達(dá)時(shí),可以考慮進(jìn)行密碼子優(yōu)化,調(diào)整同義密碼子和相關(guān)的調(diào)控元件,提高翻譯效率。通過這種方法提高異源基因翻譯效率的報(bào)道已經(jīng)很多。如為了在人胚胎腎細(xì)胞(HEK293T)中提高重組豬白細(xì)胞介素-7(pIL-7)的表達(dá),崔...
1993年,比利時(shí)布魯塞爾自由大學(xué)免疫學(xué)家Hamers-Casterman教授以及他的同事們?cè)隈橊劊橊効?,后來研究證實(shí)也包括單峰駱駝和羊駝)的血清中發(fā)現(xiàn)了一種與傳統(tǒng)抗體結(jié)構(gòu)不同的新型抗體,這種抗體僅僅由兩條重鏈構(gòu)成,被稱為重鏈抗體(heavy-chainantibody,HCAb)。重鏈抗體的重鏈的可變區(qū)稱為VHH(variabledomainofheavychainofheavy-chainantibody),通過體外重組表達(dá)制備的VHH分子質(zhì)量?jī)H僅為15kDa,是傳統(tǒng)抗...
當(dāng)建立內(nèi)切酶酶切反應(yīng)體系時(shí)有幾個(gè)關(guān)鍵因素需要考慮。比如如何在正確的反應(yīng)體系中,加入適量的DNA、內(nèi)切酶和緩沖液,就可以獲得最佳酶切效果。根據(jù)定義,在50μl體系中,1單位的限制性內(nèi)切酶可以在60分鐘內(nèi)*切割1μg的底物DNA。上述酶、DNA與總反應(yīng)體積的比值可以做為建立反應(yīng)體系的參考數(shù)據(jù)。但是,目前大多數(shù)科研人員會(huì)遵循下表中所列的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件,使用5-10倍的過量酶切割DNA,這樣有利于克服由于DNA來源不同、質(zhì)量和純度不同而造成的實(shí)驗(yàn)失敗?!皹?biāo)準(zhǔn)”反應(yīng)體系內(nèi)切酶從冰箱取出后...
FrontierScientific,Inc.(簡(jiǎn)稱FSI),創(chuàng)立于1975年,總部位于美國(guó)猶他州。自創(chuàng)立之初,F(xiàn)SI即開始為藥物研發(fā)、生物技術(shù)、工業(yè)化學(xué)、政府和科研機(jī)構(gòu)提供研發(fā)和生產(chǎn)所需要的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。FSI尤其擅長(zhǎng)研發(fā)和制造卟啉、酞菁、高級(jí)硼酸(酯)、藥物研發(fā)用小分子中間體和SAR的研究,以及從毫克到公斤級(jí)別的先導(dǎo)優(yōu)化,并能夠?yàn)榭蛻籼峁〤RO、FTE或者FFS服務(wù)。FrontierScientific,Inc.(FSI)wasfoundedin1975byDr.Bru...
服務(wù)簡(jiǎn)介無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)是一種以外源DNA或mRNA為模板,利用細(xì)胞抽提物中的細(xì)胞合成機(jī)器,蛋白折疊因子及其他相關(guān)酶系,通過添加氨基酸和T7聚合酶和能量物質(zhì)來實(shí)現(xiàn)蛋白表達(dá)的體外系統(tǒng)。其中包括真核無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)和原核無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)。艾柏森生物優(yōu)勢(shì)1.更快得到數(shù)據(jù),僅需1小時(shí)即可獲得功能蛋白,而基于細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng)則需要數(shù)天。2.節(jié)約時(shí)間,表達(dá)蛋白可以直接用后續(xù)實(shí)驗(yàn),不需要額外純化。3.更適合蛋白表達(dá),更適用于激酶等毒性蛋白的表達(dá),也可使用經(jīng)過修飾的tRNA來進(jìn)行標(biāo)記,在某特定位點(diǎn)摻...
跑電泳是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn),可能或多或少,或早或晚都要跑跑電泳。跑電泳是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn),可能或多或少,或早或晚都要跑跑電泳。跑電泳的材料是瓊脂糖,瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)常用以DNA切膠回收,DNA分離和用于佐證DNA是否重組、質(zhì)粒等是否切開。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)的一些小技巧小細(xì)節(jié)。1凝膠制作1.1凝膠濃度配制凝膠的濃度據(jù)實(shí)驗(yàn)需要而變,一般在0.8%~2.0%之間,如果一次配制凝膠100m...
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